مقایسه میزان تولید پروتئین نوترکیب در دو رده سلولی CHO و MCF7

Authors

  • احمدی, الهام گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران.
  • مشکات, زهرا گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران.
  • میرشهابی, حسام گروه ویروس شناسی، دانشکده علوم پزشکی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران.
Abstract:

Background : The aim of the present study was to identify a suitable cell line for studies of recombinant protein production in eukaryotic system. After transfection, altered expression levels of RNA and its target protein were analyzed. Materials and Methods: To investigate the in vitro expression of E6 protein of human papillomavirus type 16 in cell culture, the plasmid pcDNA3-E6, and two different cell lines MCF7 and CHO were used. Following transfection, RNA expression was determined by RT- PCR and its protein target was evaluated by Western blot using SDS-PAGE gel and Anti-E6 monoclonal antibody. Results: In this study due to the low concentration of proteins in MCF7cells, RT-PCR was positive and Western blotting was negative, while RT-PCR and Western blotting were positive for CHO cell lines. Conclusion: Regarding the results, the use of CHO expression system as a tool for efficient transfection of recombinant protein production is suggested.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

مقایسه میزان تولید پروتئین نوترکیب در دو رده سلولی cho و mcf۷

مقدمه: هدف ازمطالعه ی حاضر، مشخص نمودن رده سلولی مناسب تر، جهت مطالعات تولید پروتئین در سیستم های یوکاریوتی می باشد. پس از ترانسفکشن، تغییرات ایجاد شده در سطوح بیانیrna و پروتئین نوترکیب هدف ارزیابی شد. مواد و روش ها: به منظور بررسی بیان ژن مورد نظر و تولید پروتئین نوترکیب e6 پاپیلوما ویروس انسانی تیپ 16 در سلول های مورد آزمایش، از پلاسمید نوترکیب pcdna3-e6 و نیز دو رده سلولی متفاوت mcf7 و cho ...

full text

کلون سازی و بیان ژن هیرودین نوترکیب در رده سلولی CHO

هیرودین پروتئینی به طول 66-65 اسیدآمینه می باشد که از غدد بزاقی زالو ترشح و به عنوان یک داروی ضدانعقاد مطرح است. این دارو مهارکننده بسیار قوی ترومبین بوده و در ممانعت از ترومبوسهای عروقی موثر است. هدف از این تحقیق بررسی بیان ژن هیرودین در سلول های  CHO به عنوان یک سلول یوکاریوتی بود. در مطالعه حاضر، قطعه 221 بازی ژن هیرودین در وکتور pcDNA3.1(+) کلون گردید. وکتور نوترکیب هیرودین در سلول CHO با ا...

full text

جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO

جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور VII انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی CHO راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری‌زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره‌باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور VII ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد....

full text

افزایش تولید هورمون رشد انسانی نوترکیب در سلول‌های CHO از طریق کنترل شرایط کشت سلولی

هدف: هدف این مطالعه افزایش تولید هورمون رشد انسانی توسط اضافه کردن ترکیبات شیمیایی به محیط کشت فاقد سرم سلول‌های CHO و بررسی خواص hGH تولید شده می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه، تاثیر تیمارهای مختلف شامل غلظت‌های مختلف گلیسرول،DMSO ، NaBu و ZnSO4 در سلول‌های CHO مورد بررسی قرار گرفت و تولید GH به‏روش الایزا سنجیده شد.سلول‌ها به هر چاهک یک پلیت 12 خانه حاوی DMEM-F12 و FBS10 درصد اضافه شدند...

full text

جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور vii انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی cho

جداسازی، کلونینگ و بیان ژن فاکتور vii انعقادی نوترکیب انسانی در رده سلولی cho راحله حلبیان1، ناصر شاگردی اسماعیلی2، آرزو اوودی2، ناصر مسروری3، دکتر ناصر امیری زاده4، دکتر کامران موسوی حسینی5، دکتر احمد قره باغیان6، دکتر حوری رضوان7، دکتر محمد علی جلیلی8، دکتر مهریار حبیبی رودکنار9 چکیده سابقه و هدف فاکتور vii ، یک گلیکوپروتئین پلاسمایی است که در آبشار انعقادی تشکیل فیبرین، شرکت دارد. فاکتور vii...

full text

همسانه‌سازی و بیان ژن نوترکیب CD40Lانسانی در رده سلولی HEK293

چکیده سابقه و هدف CD40L ، پروتئینی غشایی و یکی از اعضای خانواده TNF است که نقش مهمی در انتقال پیام سلولی در ایمنی ذاتی و تطبیقی دارد. از آن جایی‌که این پروتئین نقش خود را از طریق تجمع گیرنده در سطح سلول هدف ایفا می‌کند، به ‌نظر می‌رسد فرم مالتی‌‌مری آن بتواند اثر قوی‌تری نسبت به فرم طبیعی ترایمری ایجاد کند. بر ‌این اساس در این مطالعه کلونینگ و بیان فرم کایمری و دودکامری CD40L محلول، از طریق پر...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 16  issue None

pages  99- 106

publication date 2014-09

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Keywords

No Keywords

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023